TSK凝膠色譜柱是一種廣泛應用于生物制藥、生物技術等領域的色譜分析工具。該色譜柱具有高分辨率、低吸附性和良好孔徑分布的特點,能夠精準分離蛋白質、多肽、核酸等生物大分子,以及多糖、寡糖、合成高分子等水溶性聚合物。其填料材質包括硅膠和親水性聚合物,具備優異的化學穩定性和機械強度。典型產品如TSKgel SW系列采用剛性球形硅膠基質,表面鍵合親水基團,pH耐受范圍為2.5-7.5,適用于蛋白質和多肽分析;而TSKgel PW系列則采用親水性聚合物填料,pH適用范圍擴展至2-12,可耐受含50%有機溶劑的流動相,更適合分離多糖、DNA等水溶性大分子。
一、溫度要求
操作溫度范圍:通常有特定的操作溫度范圍,一般在10-30℃之間。例如,在低于10℃時,可能需要降低流速來保證色譜柱的正常運行和分離效果;而溫度過高可能會影響凝膠的結構和性能,導致柱效下降。
穩定性要求:使用過程中應盡量保持溫度穩定,避免溫度波動。溫度的急劇變化可能會使凝膠收縮或膨脹,從而改變色譜柱的孔隙結構,影響分離效果的一致性和準確性。
二、濕度要求
一般濕度環境:通常要求在相對濕度較為穩定的環境下使用,一般相對濕度保持在40%-60%為宜。濕度過高可能會導致色譜柱外部受潮,影響其機械性能和使用壽命;濕度過低可能會使某些部件變得干燥脆弱,容易產生靜電等問題。
特殊防護措施:如果環境濕度超出正常范圍,可能需要采取相應的除濕或加濕措施。例如,在潮濕的環境中,可以使用除濕設備;在干燥的環境中,可以使用加濕器或采取其他保濕措施,但要注意避免水分直接接觸到色譜柱。
三、潔凈度要求
工作環境清潔:使用TSK凝膠色譜柱的實驗室或工作環境應保持清潔,避免灰塵、雜質等污染物進入色譜柱。因為灰塵等雜質可能會堵塞色譜柱的孔隙,影響流動相的流動和樣品的分離效果。
樣品純凈:所分析的樣品應盡可能純凈,不含大量的顆粒雜質、蛋白質沉淀物等。如果樣品中含有較多雜質,可能會污染色譜柱,降低其使用壽命和性能。在進樣前,最好對樣品進行預處理,如過濾、離心等操作,以去除雜質。
四、避光要求
防止光敏感反應:某些樣品或流動相成分可能對光敏感,在光照下會發生分解、氧化等反應,影響分析結果的準確性。因此,在使用時,應盡量避免陽光直射或其他強光照射,可以將色譜柱放置在避光的地方或使用遮光罩等裝置。
保護色譜柱材料:長時間的光照可能會加速色譜柱材料的老化和降解,降低色譜柱的性能和使用壽命。所以,減少光照對保護色譜柱的整體性能也很重要。
五、流動相環境要求
溶劑純度:流動相所使用的溶劑應具有較高的純度,一般要求為色譜純或更高級別。雜質的存在可能會與樣品發生相互作用,干擾分離過程,或者在色譜柱上產生吸附、殘留等問題,影響柱效和分離效果。
溶劑兼容性:要確保所使用的流動相溶劑與TSK凝膠色譜柱的填料相兼容。不同的凝膠色譜柱對溶劑有不同的適用范圍,例如TSK-GEL SW系列色譜柱適用于水溶液、緩沖液以及一些親水性有機溶劑如甲醇、乙腈等,但不能使用與凝膠不兼容的溶劑,否則會導致凝膠溶脹、收縮或損壞。
脫氣處理:流動相在使用前應進行脫氣處理,以避免氣泡在色譜柱中形成。氣泡的存在會干擾流動相的流動,導致流速不穩定,影響分離效果,還可能會對色譜柱造成沖擊,損壞色譜柱。